Benzylpenicillin potassium memiliki efek antibakteri yang baik terhadap streptococcus, streptococcus pneumoniae dan staphylococcus yang tidak menghasilkan enzim penisilin. Ini memiliki aktivitas antibakteri sedang melawan enterococcus. Neisseria gonorrhoeae, neisseria meningitidis, corynebacterium diphtheriae, bacillus anthracis, actinomyces bovis, streptococcus candida, listeria listeriae, leptospira dan treponema pallidum sensitif terhadap produk ini. Produk ini juga memiliki aktivitas antibakteri tertentu terhadap haemophilus influenzae dan bordetella pertussis. Aerobus gram negatif atau anaerob fakultatif lainnya memiliki kepekaan yang buruk terhadap produk ini. Produk ini memiliki efek antibakteri yang baik pada clostridium, anaerob streptokokus pencernaan dan basil .